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共聚焦显微技术的本质在于去除非焦面上的杂散光,获取Z轴方向的高分辨率图像。

盘片包括多组呈螺旋形分布的高密度针孔(总数约2万个)安装在物镜的像平面上.激发光通过真空和物镜聚焦到样本的离散的点上,盘片高速旋转,每秒钟可以照射标本几百次(相当于电光源按光栅格式高速扫描样本),实现扫描区域内由无数个点组成的场照明,使样本同时被激发.发射光通过物镜和盘片上, 针孔与激发光照射点共轭,绿除非焦面上的杂散光, 投射到目镜或CCD上,有效地生成实时焦平面图像(相当于数千个传统 Confocal的针孔在同时工作),通过高分辨率-高灵敏度Cooled CCD采集图像,或通过CARV上的目镜直接观察Confocal图像。

盘片式Confocal的明显优势是可以检测到活细胞的瞬间变化,而图像质量达到传统Confocal的分辨率. 随着CCD技术的发展,科学级CCD的量子效率(QE)更明显优于光电倍增管(PMT),因而可降低激发光强度(不使用激光),避免或减少 荧光漂白,延长试验时间,保持细胞活性,并且因CARV采用全谱光源, 只须选择适当的滤光片即可得到实验需要的特异性 激发和吸收光谱,适于多种应用,而在激光扫描Confocal中,这是不可能实现的 .

荧光显微镜只需装上CARV系统 , 即可升级为Confocal ;

使用汞灯或氙灯. 适合340nm至NIR各种波长应用 ;

滤光片组更换方便,选择范围宽,经济的实现多种应用,避免了激光器波长单一,即高昂的使用和维护成本 ;

高速拍摄,最高帧数至100fps,可以实现活细胞Confocal应用 ;

配合高速CCD相机和滤光片转轮或高速多光谱激发光源,实现多信道3D图像采集 ;

通过一个控制杆, 即可在Confocal和普通应用间切换 ;
优化光路设计,确保最大光通量(600uW@568nm,为减少荧光漂白 ;

典型应用的激发光强度在200至500uW）和 Z向分辨率.即使样本深层,亦能获取锐利的结构图像 ;